Komplet protiteles Brucella protitelesa

Specifikacija

 

Preskusni postopki in razlaga

 

1. korak Preskusni postopek

1.1 Priprava raztopine za pranje

WOrkingova koncentracija wPepelna tekočina:Pred uporabo je treba raztopino za pranje obnoviti na sobno temperaturo (20-25 stopinje) in enakomerno pretresti, da bo enakomerna. Nato zmanjšajte 20 -krat večjo raztopino za pranje s prečiščeno vodo (na primer 5 ml koncentrirane pralne raztopine dodamo v 95 ml očiščeno vodo), dobro mešamo in razredčeno pralno tekočino lahko shranimo v 2-8 7 dni.

1.2 Priprava vzorca

Vzeli so živali kri, centrifugirali so ga pri 4000 vrtljajih 10 minut in zbrali supernatant. Serum lahko tudi koaguliramo naravno brez hemolize.

②K, ko je velikost vzorca velika, da bi zagotovili, da je eksperimentalni reakcijski čas dosleden. Vzorec seruma zmešajte z delovno raztopino protiteles na 1: 1 v plošči za redčenje (70UL serumski vzorec + 70 ul delovna raztopina protiteles). Negativna kontrola in pozitivna kontrola sta enaka vzorcu v serumu.

1.3 Preskusni postopek

① Prijavite mikroplatko encimske etikete (glede na število vzorcev je mogoče razstaviti in uporabiti večkrat), nastavite dve vrtini za negativne in pozitivne kontrole, dodate 100ul od premiksane mešanice na mikroplat encimske etikete. Vzorec nežno pretresite v vrtino s folijem tesnilne plošče, da pokrijete ploščo, in 30 minut inkubirajte pri 37 stopinjah.

② Odprite film za tesnjenje, raztopino v vodnjaku plošče pretresite, dodajte 300 μl tekočine za pranje delovne koncentracije v vsako vrtino in nato zavrzite tekočino v vdolbinici. Zgornje korake ponovite 5 -krat in na koncu posušite na čistem vpojnem papirju.

③Dilutirani encim konjugat:Encimski konjugat razredčite 50 -krat (na primer: 20UL encim konjugat koncentrat + 980 ul razredči 1, posebna potrebna količina se izračuna glede na število preskusnih vzorcev), dobro premeša in odloži.

④Ad 100 µl encima konjugira na vsako vrtino, pokrije ploščo in 30 minut inkubirajte pri 37 stopinjah.

⑤ Pralni encimski plošči, specifična operacija je enaka zgornjem ②.

⑥Ud 100 µl raztopine substrata za vsako vrtino, pokrijte ploščo in inkubirajte 10 minut pri 37 stopinj stran od svetlobe.

⑦Add 50 µl raztopina za zaustavitev vsakega vrtine in rezultat določite v 5 minutah.

 

2. korak razlaga rezultatov

 

Vrednost OD450 vsake vrtine je bila prebrana na 96- bralniku mikro ploščah.

2.1 Validacija

 

Povprečna OD45 0 NM Vrednost pozitivnega nadzora je bila <0,35, povprečna vrednost OD450NM negativnega kontrolnega/pozitivnega nadzora pa večja ali enaka 3,5, eksperimentalni rezultati so bili veljavni. V nasprotnem primeru je treba test ponoviti.

2.2 Način izračuna

Za vsak vzorec izračunajte PI (BlockIngr ATE) na naslednji način z uporabo popravljenih vzorčnih in kontrolnih vrednosti:

2.3 Razlaga rezultatov

Ko je pi <20%, se oceni kot negativno.

Ko je pi> 30%, se oceni kot pozitiven.

Kadar je 20% manj kot ali enak PI manj kot ali enak 30%, ga ocenjuje kot sumljivo in predlagate ponovitev vzorčenja in testiranja en teden kasneje.

Priljubljena oznake: Brucella protitelesa Elisa Kit, China Brucella protitelesa ELISA Kit dobavitelji, proizvajalci, tovarna